Хронический гепатит В (ХГВ) остается одной из самых серьезных угроз для здоровья во всем мире: им заражены более 250 миллионов человек, и у многих он приводит к циррозу и раку печени.

Вирус гепатита В (HBV) сохраняется в организме благодаря ковалентно замкнутой кольцевой ДНК — cccDNA, которая служит постоянным источником вирусной репликации. При этом сам вирус напрямую не разрушает клетки печени: повреждения возникают из-за иммунного ответа организма и разрушения инфицированных гепатоцитов. При хронической инфекции истощение Т-клеток нарушает клиренс вируса, что приводит к стойкой репликации HBV и повреждению печени.

Для диагностики ХГВ используют комбинацию маркеров: поверхностный антиген (HBsAg), антиген HBeAg, антитела к HBc, уровень ДНК HBV, а также функциональные пробы печени и неинвазивные методы оценки фиброза — например, эластографию.

За последние двадцать лет появились эффективные методы лечения, направленные на подавление вируса и замедление прогрессирования болезни. Основные подходы — это нуклеозидные аналоги (энтекавир, тенофовир) и терапия интерфероном:

  • Нуклеозидные аналоги (НА) эффективно снижают вирусную нагрузку и замедляют прогрессирование заболевания, но не воздействуют на cccDNA, поэтому лечение приходится продолжать длительно, а его прекращение часто приводит к возобновлению репликации вируса. Кроме того, они редко обеспечивают полное удаление поверхностного антигена HBsAg.
  • Интерферон и его пегилированные формы (ПЭГ-ИФН-α2a и ПЭГ-ИФН-α2b) способны активировать иммунный ответ и в ряде случаев приводят к функциональному излечению, когда HBsAg исчезает. Однако этот результат достигается нечасто: у 3-7% пациентов с HBeAg и у 8-12% без него. К тому же лечение интерфероном часто сопровождается значительными побочными эффектами — от гриппоподобных симптомов до нарушений со стороны нервной системы, что ограничивает его применение.

Связь между активностью NK-клеток и клиническим ответом на ПЭГ-ИФН-α2b у пациентов с хроническим гепатитом В

Антитела к HBe вырабатываются примерно у 30% пациентов, получающих ПЭГ-ИФН, и у 20% пациентов на терапии НА. Однако только небольшая доля пациентов на фоне ПЭГ-ИФН достигает устойчивого контроля вируса. Это указывает на необходимость более глубокого понимания механизмов взаимодействия HBV с иммунной системой. Особый интерес вызывает роль врожденного иммунитета, в частности — естественных киллеров (NK-клеток).

NK-клетки составляют до половины всех лимфоцитов печени и играют ключевую роль в противовирусной защите. ПЭГ-ИФН-α — важный элемент терапии ХГВ — является мощным активатором NK-клеток. Более того, генетические особенности рецепторов, регулирующих их активность, связаны с вероятностью вирусного клиренса на фоне лечения.

У человека выделяют два подтипа NK-клеток:

  • CD56dim, обладающие высокой цитотоксичностью и составляющие до 90% от общего числа;
  • CD56bright, секретирующие цитокины ИФН-γ и TNF-α и составляющие около 10%.

Активность NK-клеток определяется балансом сигналов от активирующих и ингибирующих рецепторов, включая иммуноглобулиноподобные рецепторы-киллеры, рецепторы естественной цитотоксичности (NKp30, NKp44, NKp46) и рецепторы семейства C-лектина (NKG2A/CD94, NKG2C/CD94, NKG2D, CD161). Преобладание активирующих сигналов запускает высвобождение перфорина и гранзимов и ведет к разрушению инфицированных клеток.

Китайские ученые исследовали связь между активностью NK-клеток и клиническим ответом на ПЭГ-ИФН-α2b у HBeAg-положительных пациентов с ХГВ. Сохранение количества и восстановление функции NK-клеток, экспрессирующих NKp30 на высоком уровне и NKG2A на низком, связано с лучшим ответом на лечение. Напротив, у пациентов без ответа на лечение наблюдалось увеличение количества NK-клеток NKp30, экспрессирующих NKG2A на высоком уровне, что указывает на ингибирующую роль NKG2A и связанную с ним дисфункцию клеток.

Дизайн исследования и характеристика пациентов

В исследовании участвовали 102 пациента с HBeAg-положительным хроническим гепатитом В, которые не получали противовирусной терапии как минимум за 6 месяцев до начала наблюдения.

Пациентов случайным образом распределили на две группы лечения:

  • первая получала стандартное лечение ПЭГ-ИФН-α2b подкожно 1 раз в неделю (1,5 мкг/кг массы тела в течение 12 месяцев);
  • вторая получала ту же схему ПЭГ-ИФН-α2b в комбинации с адефовиром дипивоксилом (ADV) в дозе 10 мг ежедневно.

До и после начала лечения у всех пациентов брали образцы периферической крови.

Для последующего анализа были отобраны 92 пациента. Среди них 17 человек достигли стойкого ответа на лечение: исчезновение HBeAg, уровень ДНК HBV <2000 МЕ/мл и образование антител к HBe. У оставшихся 75 пациентов не произошел клиренс HBeAg, а уровень HBV ДНК сохранялся ≥2000 МЕ/мл к концу наблюдения.

Лечение ПЭГ-ИФН-α2b поддерживало противовирусную функцию NKp30 NK-клеток

Лечение ПЭГ-ИФН-α2b (как при монотерапии, так и в комбинации с ADV) вызывало увеличение числа CD56bright NK-клеток. Комбинация с ADV не улучшала показатели устойчивого вирусологического и серологического ответа. При этом у пациентов наблюдалось стойкое повышение уровня NK-клеток, экспрессирующих NKp30, что могло быть связно с клиническими исходами.

Недавнее исследование показало значительное увеличение экспрессии NKp30 на CD56bright NK-клетках после 6 месяцев терапии ПЭГ-ИФН-α. Высокий уровень NKp30 CD56bright и CD56dim клеток ассоциировался с более низкими уровнями HBsAg во время последовательного лечения НА.

Анализ динамики субпопуляций NK-клеток показал, что увеличение экспрессии NKp30 связано с более низкими уровнями ДНК HBV и HBeAg. Возможной причиной увеличения числа NKp30 NK-клеток является продукция IL-15, которая стимулируется ПЭГ-ИФН-α. В настоящем исследовании ПЭГ-ИФН-α2b действительно усиливал пролиферацию NKp30 NK-клеток за счет стимуляции продукции IL-15. Это подтверждается повышенной экспрессией Ki-67 в NKp30 NK-клетках, что указывает на их активное деление.

У пациентов, ответивших на лечение, отмечалось более быстрое увеличение числа NK-клеток, экспрессирующих ИФН-γ и CD107a, по сравнению с не ответившими. Это сопровождалось ростом экспрессии NKp30, что свидетельствует о более высоком функциональном профиле NK-клеток, экспрессирующих NKp30.

Кроме того, у пациентов, ответивших на лечение, накапливались CD56dim NKp30 CD62L-клетки. CD62L является маркером зрелой субпопуляции NK-клеток в печени и влияет на величину локального ответа NK-клеток на вирусную инфекцию. Полученные результаты свидетельствует о том, что NKp30 CD62L NK-клетки могут играть важную роль в контроле HBV во время терапии ПЭГ-ИФН-α2b.

Высокий уровень экспрессии NKG2A на NKp30 NK-клетках связан с отсутствием ответа на лечение

Функциональные дефекты NK-клеток, наблюдаемые после терапии ПЭГ-ИФН-α2b, могут быть связаны с высокой экспрессией ингибирующего рецептора NKG2A на активированных NKp30 NK-клетках. Таким образом, экспрессия NKG2A на NKp30 NK-клетках может служить маркером, по которому можно предсказать эффективность лечения ПЭГ-ИФН-α у пациентов с ХГВ.

Полезная статья, нужная информация? Поделитесь ею!

Кому-то она тоже будет полезной и нужной:

Источники

Наш канал в Telegram:

Статьи по схожим темам: